ELISA試劑盒在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記，買前要和技術人員詳細溝通，有些產品分類很細，同一個項目會有幾個試劑盒。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開，再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保存其免疫學活性，又保存酶的活性。關于抗凝血和得到的血清血漿體積的關系，大致上比例是1毫升全血可以得到500 ul 血清或血漿。
由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。需要的樣本量取決于你的檢測項目，有些檢測項目需要血清做1:100稀釋，甚至是更高的稀釋度，那么幾微升血樣就夠了，有些項目只能做較低的稀釋，甚至不稀釋，這樣的話每孔會需要100 ul 左右。購買ELISA試劑盒首先要注意有效期，盡量買剛出廠不久的。大家更多的了解試劑盒無非就是擔心實驗能否成功，試劑盒結果出來以后如何解釋。只要是商品化試劑盒，都是比較穩定的，但是ELISA試劑盒一般檢測抗原不如檢測抗體準確度高。