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ELISA試劑盒的制備要點

2014-01-15 [946]

科研人員在具體實驗過程中更要嚴謹認真,ELISA試劑盒操作過程中各個環節對試驗的檢測效果影響較大,稍有不慎,出現顯色不全、花板等結果也是常有的事情。文章將試驗中各個操作步驟常出現問題的原因及解決辦法總結于下,希望能夠對一些初步學習者有所幫助:這些難于采用傳統培養方法檢測的病原體感染診斷治療的要求,迫使人們必須去尋找其他的檢測途徑,直接的或是間接的。
 此外,即使是可以用傳統培養方法培養的病原體,僅進行形態及生物化學鑒定,有時并不足以*準確地鑒定病原體,仍具有一定程度的盲目性。于是,隨著人們對病原體感染與機體免疫應答的逐步認識,以抗原抗體特異反應為基礎的,更為快速簡便的免疫檢驗方法就應運而生了。ELISA試劑盒載體的形狀主要有三種:小試管、小珠和微量反應板。小試管的特點是兼作反應的容器,zui后放入分光光度計中比色。小珠一般為直徑0.6cm的圓球,表面經磨砂處理后吸附面積大增加。
如用特殊的洗滌器,在洗滌過程中使圓珠滾動淋洗,效果更好。zui常用的載體為微量反應板,于ELISA測定的產品也稱為ELISA試劑盒,通用的標準板形是8×12的96孔式。為便于作少量標本的檢測,有制成8聯或12聯孔條的,放入座架后,大小與標準ELISA板相同。ELISA試劑盒的特點是可以同時進行大量標本的檢測,并可在特定的比色計上迅速讀出結果。現在已有多種自動化儀器用于微量反應板型的ELISA檢測,包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟,對操作的標準化有重要意義。