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ELISA試劑盒放在透明晶體內(nèi)培養(yǎng)的方法

2016-02-24 [1327]

有關(guān)研究于8年前已開展,但頭3年進(jìn)展不大,至04年組織新團(tuán)隊(duì)后,經(jīng)過余聰?shù)热诉M(jìn)行了超過1萬次的實(shí)驗(yàn)后,終于通過將“機(jī)動(dòng)蛋白6”ELISA試劑盒放在透明晶體內(nèi)培養(yǎng)的方法,于顯微鏡中觀察到它的具體結(jié)構(gòu),從而摸索出整個(gè)運(yùn)動(dòng)模式。Duan等制備了環(huán)丙沙星多克隆抗體,并建立了檢測環(huán)丙沙星殘留的Ci-ELISA方法,檢測限為0.32ng/mL標(biāo)準(zhǔn)曲線0.32ng/mL~5000 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,批內(nèi)和批間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為5.81%和11.23%。環(huán)丙沙星在豬肉、雞肉及牛乳中的回收率分別為75.58%、81.2%和84.5%。抗血清與思諾沙星的交叉反應(yīng)率為69.8%,與金霉素、慶大霉素、青霉素、新霉素、喹乙醇和磺胺等無交叉反應(yīng)。蔡勤仁等制備了恩諾沙星單克隆抗體,Ci-ELISA的zui低檢測限為0.13ng/mL。固定標(biāo)本的保存:標(biāo)本材料經(jīng)固定后,要立即使用于免疫酶技術(shù)中,不要久貯。ELISA試劑盒如實(shí)在要保存,應(yīng)置于冰箱(4℃)中,在干燥的情況下24h內(nèi)抗原性損失不大。在-20℃下,冰Muloon等制備了鹽霉素人工抗原SAL-BSA,并以之免疫BALB/c小鼠,篩選出16株單克隆抗體,在此基礎(chǔ)上建立了檢測鹽霉素的Ci-ELISA方法。單抗對(duì)鹽霉素有很高的選擇性,能識(shí)別甲基鹽霉素而與拉沙里菌素和莫能菌素沒有交叉反應(yīng)。該研究還比較了HPLC和ELISA兩種方法,ELISA試劑盒結(jié)果表明兩種方法有很好的相關(guān)性(P<0.001),但ELISA方法更靈敏,其檢測限(50ug/kg)較HPLC(100ug/kg)低。Mount等建立了莫能菌素的免疫檢測方法,檢測限為