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血清學(xué)各項指標(biāo)的檢測方法

2010-04-30 [3437]

實驗動物的種類繁多,各種指標(biāo)的檢測方法往往各不相同,而且每個人在做動物試驗時所需要檢測的指標(biāo)也各不相同,每個人掌握的測定方法也各不相同。

    能到本版來的各位戰(zhàn)友相信都做過動物試驗,也檢測過實驗動物的指標(biāo),希望各位戰(zhàn)友能將自己檢測實驗動物的各種指標(biāo)時所使用的方法拿出來與大家分享。以至于dxy能夠?qū)⒏魑坏膶嵱梅椒ㄏ到y(tǒng)的組織起來,形成一個比較完善的實驗動物常用指標(biāo)的檢測方法!

    拋磚引玉:

一.體重的測量方法

動物體重的測量一般使用普通天平或電子天平等稱量儀器,在稱量前應(yīng)禁食(不禁水),以減少食物對體重的影響。如果進行長期的實驗時,應(yīng)每隔7~10天稱量一次。
小鼠、大鼠:稱量可用普通的天平或者電子秤稱重。
兔、豚鼠:可直接放在嬰兒秤上稱重,從嬰兒秤圓形刻度盤上讀取動物體重。
犬:經(jīng)訓(xùn)練后可直接放在磅秤上稱重。未經(jīng)馴服的犬,先將犬嘴綁好,由實驗員把犬抱起站在磅秤上稱重,記下讀數(shù),減去實驗員體重,即為動物體重。

二.體溫的測定方法

動物體溫測定可采用普通體溫計(肛表、口表)或半導(dǎo)體溫度計,為防止測定過程中動物掙扎,以至于挫傷腸壁或折斷體溫計,在測定前應(yīng)先固定好動物。肛表測溫可由實驗者右手固定體溫計,3分鐘后取出觀察讀數(shù)。半導(dǎo)體點溫度計在測定時可立即從溫度表上讀取溫度數(shù)。
測定溫度時應(yīng)注意如下幾點:
(1)  檢查肛表水銀柱是否已甩下來,半導(dǎo)體點溫度計的指針是否指在零位。
(2)  環(huán)境溫度對動物體溫的測定有一定的影響,一般環(huán)境溫度應(yīng)控制在18~28℃。
(3)  測量溫度時應(yīng)連續(xù)測定2~3次,取平均值。
(4)  插入直腸的深度取決于動物的大小,犬、貓、兔3.5~5cm,豚鼠3.5cm,大鼠、小鼠1.5~2.0cm。為了使插入深度一致,可用膠皮管套在溫度計上,作為“限止環(huán)”。
(5)  每次測定時間要一致。一般體溫計放入直腸內(nèi)固定時間為3分鐘,而每天測定的時間也大致一樣,如*次在上午測定,以后均應(yīng)在上午測定。
(6)  防止有大便阻塞和動物掙扎造成直腸損傷及出血現(xiàn)象。
(7)  測定時盡可能使動物處于自然狀態(tài),勿使其過于緊張、恐懼。

三.脈搏的檢查方法

檢查犬、貓、兔等較大動物的脈搏時,先將動物略加固定,待其安靜后,用右手伸入動物股部內(nèi)側(cè),用手指按股動脈測脈率1分鐘,計算每分鐘脈搏次數(shù)。小動物的脈搏不易摸測,可直接在動物左側(cè)胸部用手觸及心跳zui明顯處,計數(shù)一定時間,算出每分鐘心跳次數(shù),也可用聽診器或測量儀器進行測量。此外,在測量時應(yīng)排除溫度、濕度、動物的興奮狀態(tài)、健康狀況、特殊的生理狀況等對脈搏的影響。

四.呼吸頻率的測定方法

根據(jù)呼吸原理,動物的呼吸次數(shù)測定方法有人工記錄法、氣管插管呼吸描記法、鼻插管呼吸描記法、記錄儀法(生理記錄儀法)。
(一)人工記錄法:測定呼吸頻率前,首先必須使動物處于相對安靜狀態(tài),然后以肉眼觀察并記錄呼吸的次數(shù),一般要求記錄1分鐘的呼吸次數(shù)。
(二)氣管插管描記法:按氣管插管術(shù)插好Y型氣管插管,然后將Y形插管的一端經(jīng)橡皮管與瑪利氣鼓相連,即可描記呼吸,另一端可作為呼吸備用通道,若需人工呼吸時,將此端與人工呼吸機送氣管相連,開動人工呼吸機即可進行人工呼吸。
(三)鼻插管描記呼吸法:將動物固定,插管連以橡皮管,將插管涂上液體石蠟后,插入一側(cè)鼻孔內(nèi),用膠布固定。橡皮管的另一端與瑪利氣鼓相連,描筆將呼吸活動記于記紋鼓上。轉(zhuǎn)動鼻插管的角度,使描筆的劃線達到zui大幅度。
(四)二道生理記錄儀測定法:將張力換能器與記錄儀和動物相連。經(jīng)換能器導(dǎo)線輸入記錄儀,換能器彈簧經(jīng)細線固定于動物體表一定位置,使細線牽張力適度。按測呼吸需要選擇適當(dāng)?shù)撵`敏度、時間常數(shù)、濾波后,將前置測量開關(guān)置于通的位置。按下走紙速度鍵,即可描記呼吸變化曲線。

五.尿液的檢查方法

用清潔容器收集新鮮尿液,以晨尿為好,因晨尿濃度較高,易發(fā)現(xiàn)病理成分。
(一)  尿量檢查
常用實驗動物的尿量如下:
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
動物種類 尿量(mL) 動物種類 尿量(mL)
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
獼 猴 1 10—550 犬(4.5kg) 65—400
馬 1 900—11 400 貓(2—4kg) 40—120
牛 1 1400—19 400 兔(1.5—2.5kg) 60—250
豬 1 900—3 800 豚鼠 15—75
山羊 700—2 000 大鼠 10—15
綿羊 900—1 900 小鼠 1—3
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
1 尿量增多 一晝夜尿量超過正常值范圍,稱為多尿。生理性尿量增多見于大量飲水或食含水分過多的蔬菜所致。病理性尿量增多,見于糖尿病、尿崩癥等。
2 尿量減少 一晝夜尿量少于正常值范圍稱少尿。見于急性腎炎、急性腎功能衰竭等。
(二)尿色檢查 正常新鮮尿液多為或淡,尿的顏色多受食物或藥物的影響。病理情況下可有以下變化:
1 血尿 呈洗肉水樣或混有血凝塊。
2 血紅蛋白尿 呈濃茶色或醬油色,鏡檢無紅細胞,隱血試驗為陽性。
3 膽紅素尿 呈深,振蕩后泡沫亦呈。
4 乳糜尿 為乳白色尿液,有時混有少量血液。
(三)尿酸堿反應(yīng) 正常一晝夜混合尿液呈弱酸性,pH值為5.4—8.4。在酸中毒、發(fā)熱時,尿液可呈較強酸性,可用pH試紙測定。

六.糞便的檢查方法

糞便檢查常用于了解糞便中有無炎性產(chǎn)物、血液、寄生蟲卵或蟲體等病理成分,并可判斷胃腸、胰腺、肝、膽功能狀態(tài)及糞便中有無致病菌。
(一)一般性狀檢查
1 顏色:黃褐、黑色、灰白、鮮紅等。
2 性狀:水樣或粥樣、粘液、膿樣、血樣。
3 氣味:特殊臭味、酸臭、***臭。
(二)顯微鏡檢查 在潔凈的載玻片上滴1滴生理鹽水,用木簽挑取少許糞便與生理鹽水混合,涂勻,厚度適中。仔細觀察各種細胞、阿米巴包囊及滋養(yǎng)體等。
(三)隱血檢查 當(dāng)上消化道少量出血時,糞便外觀無異常改變。凡疑有上消化道少量出血,應(yīng)進行隱血檢查。
隱血檢查時,將少許糞便涂于潔凈玻片或濾紙條上,加1%聯(lián)苯胺冰醋酸液及3%過氧化氫液各一滴。如無顏色改變?yōu)殛幮苑磻?yīng);出現(xiàn)藍顏色變化為陽性反應(yīng)。根據(jù)顏色出現(xiàn)的快慢和深度,將陽性結(jié)果分為四級:立即出現(xiàn)深藍色為(++++);30s內(nèi)出現(xiàn)為(+++);l min內(nèi)出現(xiàn)為(++);2min內(nèi)出現(xiàn)為(+)。
正常為陰性,上消化道出血為陽性。

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