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ELISA試劑盒的優(yōu)點和影響因素?

2013-09-18 [1148]

       ELISA試劑盒檢測技術(shù)的優(yōu)點近二十幾年來,免疫學分析方法發(fā)展很快,特別是在使用標記了的抗原和抗體的分析技術(shù)以后,使原來許多經(jīng)典的分析方法在敏感性和特異性方面都不能相比。繼50年代的免疫熒光(IFA)和60年代的放射免疫(RIA)分析技術(shù)之后,在70年代初期又建立了用酶來標記抗原或抗體的分析技術(shù)。由于酶的生物催化作用,一個酶分子在數(shù)分鐘內(nèi)可以催化幾十幾百個底物分子發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生了放大作用,使得原來極其微乎其微的抗原或抗體在數(shù)分鐘后就可被識別出來,這種技術(shù)被稱為酶聯(lián)免疫吸附試驗法(Enzyme—Linked Immunosorbent Assay,ELISA),本法自70年代初期由VAN WEEMEN、SCHUARS.ENGVALL及PERLMARN等相繼分別報道后,現(xiàn)已引起廣泛重視。   ELISA試劑盒法是免疫診斷中的一項新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴大,可概括四個方面: 1、免疫酶染色各種細胞內(nèi)成份的定位。 2、研究抗酶抗體的合成。 3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。 4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。 酶聯(lián)免疫吸附試驗法以其靈敏度高(可達 ng 甚至pg 水平),特異性好等優(yōu)點,在生命科學各領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用,它已邁出醫(yī)藥、臨床領(lǐng)域,步入農(nóng)業(yè)、漁業(yè)、畜牧業(yè)和食品加工業(yè) 。
下面將  ELISA試劑盒 法與免疫熒光(IFA)和放射免疫(RIA)的各自優(yōu)缺點作一簡要的比較三種方法的優(yōu)缺點比較:方法種類 ELISA RIA IFA敏感性 高 高 低特異性 取決于抗原制備 取決于抗原制備 較高重演性 尚滿意 尚滿意 尚滿意結(jié)果判斷 客觀 客觀 有主觀因素抗原制備 較容易或復(fù)雜 較容易或復(fù)雜 較容易結(jié)合物制備 正在標準化 已標準化 已標準化在野外條件下用于大量人群標本的普查 可以 困難 尚可以分析自動化 可以 可以 困難主要設(shè)備 酶標比色計 粒子計數(shù)器 熒光顯微鏡試驗成本 低 高 較高試劑半衰期 長 短 長對人的危害性 無或很少 有 無或很少主要檢測對象 抗體或抗原 抗原 抗體或抗原應(yīng)用范圍 小的診斷實驗室 大的中心實驗室 小的診斷實驗室。

 

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