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小鼠ELISA試劑盒離心方法簡介

一、差速離心法

它利用不同的粒子在離心力場中沉降的差別，在同一離心條件下，沉降速度不同，通過不斷增加相對離心力，使一個非均勻混合液內的大小、形狀不同的粒子分部沉淀。操作過程中一般是在離心后用傾倒的辦法把上清液與沉淀分開，然后將上清液加高轉速離心，分離出第2部分沉淀，如此往復加高轉速，逐級分離出所需要的物質差速離心的分辨率不高，沉淀系數在同一個數量級內的各種粒子不容易分開，常用于其他分離手段之前的粗制品提取

二、速率區帶離心法

速率區帶離心法是在離心前于離心管內先裝入密度梯度介質（如蔗糖、甘油、KBr、CsCl等），待分離的樣品鋪在梯度液的頂部、離心管底部或梯度層中間，同梯度液一起離心。離心后在近旋轉軸處（X 1 ）的介質密度小，離旋轉軸遠處（X 2 ）介質的密度大，但大介質密度必須小于樣品中粒子的小密度，即ρ P ＞ρ m 。這種方法是根據分離的粒子在梯度液中沉降速度的不同，使具有不同沉降速度的粒子處于不同的密度梯度層內分成一系列區帶，達到彼此分離的目的。梯度液在離心過程中以及離心完畢后，取樣時起著支持介質和穩定劑的作用，避免因機械振動而引起已分層的粒子再混合。

由于ρ P ＞ρ m 可知S＞0，因此該離心法的離心時間要嚴格控制，既有足夠的時間使各種粒子在介質梯度中形成區帶，又要控制在任一粒子達到沉淀前。如果離心時間過長，所有的樣品可全部到達離心管底部；離心時間不足，樣品還沒有分離。沉降受物質本身大小的影響較大，一般是應用在物質大小相異而密度相同的情況。常用的梯度液有Ficoll、Percoll及蔗糖。

三、等密度離心法

等密度離心法是在離心前預先配制介質的密度梯度，此種密度梯度液包含了被分離樣品中所有粒子的密度，待分離的樣品鋪在梯度液頂上或和梯度液先混合，離心開始后，當梯度液由于離心力的作用逐漸形成底濃而管頂稀的密度梯度，與此同時原來分布均勻的粒子也發生重新分布。當管底介質的密度大于粒子的密度，即ρ m ＞ρ P 時粒子上浮；在彎頂處ρ P ＞ρ m 時，則粒子沉降，后粒子進入到一個它本身的密度位置即ρ P ＝ρ m ，此時dx/dt為零粒子不再移動，粒子形成純組份的區帶，與樣品粒子的密度有關，而與粒子的大小和其他參數無關，因此只要轉速、溫度不變，則延長離心時間也不能改變這些粒子的成帶位置。