上海研域生物一路走來依靠豐富的經驗、優良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間、具競爭力的價格的優勢等，下面研域生物講解小鼠ELISA雙抗體夾心法操作步驟有哪些：

（1）包被：用包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1-10 μg/mL。在酶標板反應孔中加0.1 mL，4℃過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗板3 次，每次3 min。

（2）加樣：加一定濃度稀釋的待檢樣品（同時做空白對照，陰性對照孔及陽性對照）0.1 mL 于上述已包被的反應孔中，置濕盒中，37℃， 1 hr。用洗滌緩沖液洗板3 次，每次3 min。

（3）加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體 （經滴定后的稀釋度） 0.1ml。37℃，0.5 - 1 hr，用洗滌緩沖液洗板3 次，每次3 min。

（4）加底物液顯色：于各反應孔中加入現配的TMB 底物溶液0.1 mL，37 ℃，10 - 30min。

（5）終止反應：于各反應孔中加入終止液0.05 mL。

（6）結果判定：將酶標板在酶標儀上，于450 nm （若ABTS 顯色，讀410 nm），讀數，輸出到Excel 中。

（7）以標準品濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，生成標準曲線和直線回歸方程式，根據公式計算未知樣品的濃度，并記錄。

上海研域生物小鼠ELISA雙抗體夾心法采用進口材料生產，專業的酶免專家，提供免費代測，數據分析，技術服務。產品遠銷全國各地。多年以來我們以極其苛刻的要求控制產品的質量，堅持生物科學研究與世界同步的理念。