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淺析酶聯免疫試劑盒的工作原理及其工作環境

2022-08-15 [1608]
  酶聯免疫試劑盒是酶免疫測定技術中應用的技術。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的ELISA法有雙抗體夾心法和間接法,前者用于檢測大分子抗原,后者用于測定特異抗體。
 
  酶聯免疫試劑盒的工作原理:
 
  促卵泡素(FSH)是動物腦垂體分泌作用于卵巢卵泡生長、發育、分化、成熟和排卵的重要繁殖激素.由于是生物大分子,不能透過細胞膜,FSH必須與靶細胞膜上的促卵泡素受體(FSHR)結合,經過受體介導將信息傳遞到靶細胞內,才能發揮其生物學功能.所提供的ELISAKit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。
 
  檢測相抗體也為多克隆抗體,經生物素(biotin)標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
 
  酶聯免疫試劑盒的工作環境:
 
  1、37℃恒溫箱。
 
  2、標準規格酶標儀。
 
  3、自動洗板機。
 
  4、單通道或多通道可調節移液器以及其吸頭。
 
  5、蒸餾水,容量瓶等。
 
  6、干凈的試管和Eppendof管。
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