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微量加樣器(移液器)使用的一般原則
2011-11-25
1954
微量加樣器(移液器)使用的一般原則在免疫測定及其他生物醫學研究中,加樣器的使用離不開一次性的塑料吸頭,盡管一次性塑料吸頭的使用增加了實驗費用,但降低了實驗技術人員接觸傳染性病原體及有害實驗材料如放射性核素的可能性,并且避免了吸頭多次重復使用所必需的清潔過程和腐蝕性去垢劑的使用。此外,在有些應用上,如PCR測定中,吸頭必須是一次性的,以避免潛在污染發生的可能性。加樣器根據使用的要求,也在不斷發展。如可整體高壓滅菌加樣器的出現。使用UV線穩定的塑料制作加樣器對于加樣器在許多方面的... -
酶標記抗體法標記抗體的制備
2011-11-22
1868
酶標記抗體法標記抗體的制備酶標記抗體法(enzaymelabelledantibodytechnique)是用結合物將酶結合在抗體分子上,制備成酶標記抗體,通過抗原—抗體反應使抗原—抗體復合物上帶有酶分子,再借助酶對底物的特異性催化作用,在抗原—抗體反應部位形成不溶性有色產物,用于研究抗原物質分布和性質。酶標記抗體法又分為直接法和間接法,目前應用zui多的酶是辣根過氧化酶(HRP),底物是3,3’—二氨基聯苯胺(DAB)??贵w蛋白分子與酶分子(如HRP或AKP)以一定的方式相... -
哺乳動物細胞的RNAi技術策略
2011-11-16
1982
哺乳動物細胞的RNAi技術策略目前RNAi技術已經進入了生物科學研究的許多領域,成為了一種主要的生物學研究工具,發展得相當迅速,并受到了此次諾貝爾獎評審委員會的青睞,獲得2006年諾貝爾獎醫學/生理獎。然而這一才歷經十個年頭的技術依然對于許多研究人員來說還是很陌生的,以下是有關RNAi技術在哺乳動物細胞中應用的具體設計策略,主要來自于《遺傳》雜志2005年“RNA干涉(RNAi)技術應用于哺乳動物細胞的研究策略”,希望能給從事或者準備從事RNAi相關實驗的研究人員以幫助。哺乳... -
生物素-親和素系統(BAS)ELISA和免疫組化技術
2011-11-7
3897
生物素-親和素系統(BAS)ELISA和免疫組化技術20世紀70年代后期在免疫酶技術中利用生物素-親和素系統(biotin-avidinsystem,BAS)標記抗體發展了又一種新型生物反應放大技術,即BAS-ELISA技術,它使用生物素-親和素-過氧化物酶復合物作為指示劑,組成一新的生物放大系統進一步提高檢測的敏感度。生物素(biotin)是廣泛分布于動植物體內的一種生長因子,又稱輔酶R或維生素H。親和素(avidin)是卵白及某些微生物中的一種蛋白質,由4個亞單位組成。二... -
PCR-ELISA法診斷禽流感
2011-11-3
2240
PCR-ELISA法診斷禽流感PCR-ELISA是將一步RT-PCR技術與酶聯免疫吸附法相結合,檢測病毒的一項診斷技術。PCR的一對引物中,其中一個用生物素標記、另一個用地高辛標記,在酶標微孔板上用親和素包被,PCR擴增后純化片段加入微孔板中。此時,微孔板上包被的親和素將與生物素標記引物上的生物素特異性結合而捕捉了PCR片段,然后在微IL板中加入辣根過氧化物酶標記的抗地高辛抗體,該抗體將與地高辛標記引物上的地高辛結合,從而形成親和素-生物素-PCR片段-地高辛-地高辛抗體-辣... -
酶聯免疫吸附試驗(ELISA)診斷豬囊尾蚴病病
2011-11-1
2712
酶聯免疫吸附試驗(ELISA)診斷豬囊尾蚴病病目前實驗室開發的新型檢測方法主要是以ELISA及改良的ELISA為主。分別用5種不同改良的ELISA平行檢測囊蟲抗體:ABC-ELISA、經典ELISA、SPA-ELISA、快速法ELISA和BAELISA,試驗結果差異不顯著,說明方法學的選擇主要依據習慣和試驗的目的。N.S.Odashima(2002)用ELISA法診斷不同的患者群血清中抗體的種類,發現ELISA—lgG敏感度zui高,分別達到88.5%和93.2%,這說明該方...

